plexin-B1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401840-LAC

PLXNB1 kodiert Plexin-B1, einen Single-Pass-Transmembranrezeptor für Semaphorine der Klasse 4, der den Umbau des Zytoskeletts, Zellmigration, Adhäsion und Axonführung reguliert. Über Wechselwirkungen mit GTPasen der Rho-Familie und Signalintermediaten wie MET und ERBB2 koppelt Plexin-B1 extrazelluläre Semaphorin-Signale an Veränderungen der Aktindynamik und zelluläre Motilitätsprogramme. Die Aktivität von Plexin-B1 beeinflusst angiogene und neuronale Musterbildungsprozesse und kann in krankheitsrelevanten Zellmodellen invasives Verhalten sowie mit der epithelial–mesenchymalen Transition (EMT) assoziierte Signalwege modulieren. Veränderte PLXNB1-Expression oder -Signalgebung wurde mit fehlregulierten Leit- und Migrationsphänotypen in neuroentwicklungsbezogenen Kontexten und in der Krebsbiologieforschung in Verbindung gebracht.

plexin-B1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PLXNB1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

plexin-B1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PLXNB1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen plexin-B1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PLXNB1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.