PLC γ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400472-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PLC γ1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PLC γ1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PLC γ1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PLCG1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PLC γ1 Anticorpo (E-12): sc-7290
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PLC γ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400472-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PLC γ1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400472-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PLCG1 codifica a fosfolipase Cγ1 (PLCγ1), uma enzima de sinalização proximal ao receptor que hidrolisa o PIP2 para gerar IP3 e diacilglicerol, promovendo a mobilização intracelular de Ca2+ e a ativação da proteína quinase C (PKC). A PLCγ1 é ativada a jusante de receptores tirosina-quinase e de receptores imunes, integrando sinais que regulam proliferação, diferenciação, remodelamento do citoesqueleto e migração celular. Esse eixo se conecta às vias de sinalização PI3K–AKT e MAPK/ERK e modula saídas transcricionais por meio de efetores dependentes de Ca2+. A atividade desregulada de PLCG1 tem sido implicada em contextos de sinalização oncogênica e de ativação aberrante de células imunes, sustentando sua relevância em estudos mecanísticos de transdução de sinal.
PLC γ1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PLCG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PLCG1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PLCG1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PLCG1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.