Placental lactogen II Double Nickase Plasmid (h): sc-402301-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Placental lactogen II Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Placental lactogen II Double-Nickase-Plasmid (h) und Placental lactogen II Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CSH2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Placental lactogen II Double Nickase Plasmid (h) | sc-402301-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Placental lactogen II Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402301-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSH2 kodiert das plazentare Laktogen II, ein Mitglied der Somatotropin-/Prolaktin-Hormonfamilie, das überwiegend von plazentaren Trophoblasten gebildet wird. Die Signalübertragung durch plazentares Laktogen nutzt prolaktin- und wachstumshormonrezeptorverwandte Signalwege und beeinflusst JAK–STAT sowie nachgeschaltete transkriptionelle Programme, die die mütterliche metabolische Anpassung, die Unterstützung des fetalen Wachstums und die endokrine Funktion der Plazenta regulieren. Die Expression von CSH2 ist eng mit der Trophoblastendifferenzierung und der Plazentaentwicklung verknüpft und eignet sich daher als nützlicher Marker zur Untersuchung der plazentaren Reifung und der Hormonproduktion. Veränderte Expression von plazentarem Laktogen wurde im Zusammenhang mit Plazentainsuffizienz und schwangerschaftsassoziierten Stoffwechselstörungen untersucht und unterstützt die Forschung zur endokrinen Dysregulation an der mütterlich-fetalen Schnittstelle.
Placental lactogen II Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CSH2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CSH2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CSH2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CSH2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.