Placental lactogen II CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422277

Übersicht

Prl3b1 kodiert das murine plazentare Laktogen II, ein Zytokin der Prolaktin-/Wachstumshormon-Familie, das während der Schwangerschaft überwiegend in Trophoblasten-Linien exprimiert wird. Plazentares Laktogen II unterstützt mütterlich‑fetale Anpassungen, indem es endokrine und metabolische Prozesse moduliert, darunter die Signalübertragung über den Prolaktinrezeptor (PRLR) mit nachgeschalteten JAK2‑STAT5‑Transkriptionsprogrammen, die den Nährstoffmetabolismus und den Umbau mütterlicher Gewebe beeinflussen. In der Plazenta ist die Prl3b1-Aktivität mit der Trophoblastendifferenzierung und der Regulation der mütterlichen Physiologie verknüpft, was sie für die Untersuchung der Plazentaentwicklung und des endokrinen Crosstalks relevant macht. Eine dysregulierte plazentare Laktogen-Signalgebung wurde in Modellsystemen mit verändertem fetalem Wachstum und Schwangerschaftskomplikationen in Verbindung gebracht, wodurch Prl3b1 als nützlicher Genlokus für mechanistische Untersuchungen plazentarer Dysfunktionen positioniert ist.

Das Placental lactogen II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Prl3b1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Prl3b1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Prl3b1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Placental lactogen II-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Prl3b1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Placental lactogen II-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Prl3b1-Exone abzielen, die für die Placental lactogen II-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Prl3b1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Placental lactogen II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Placental lactogen II CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Prl3b1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Placental lactogen II HDR-Plasmid (m) und Placental lactogen II HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Prl3b1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Prl3b1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.