Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422276
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Placental lactogen Iα Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Placental lactogen Iα-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-422276 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Prl3d1 kodiert das murine plazentare Laktogen Iα, ein Hormon aus der Prolaktin/Wachstumshormon-Familie, das während der Schwangerschaft überwiegend von Trophoblasten-Linien gebildet wird. Plazentares Laktogen Iα aktiviert die Signalübertragung über den Prolaktinrezeptor und beeinflusst dadurch JAK2–STAT5 sowie verwandte Transkriptionsprogramme, die mütterliche metabolische Anpassungen koordinieren und über endokrine und parakrine Effekte das fetale Wachstum unterstützen. In der Plazenta trägt Prl3d1 zur Trophoblastendifferenzierung, zur endokrinen Funktion der Plazenta und zur Regulation der Nährstoffzuteilung an der mütterlich-fetalen Grenzfläche bei. Eine Fehlregulation von Plazenta‑Laktogen‑Signalwegen wird häufig in Modellen gestörter Plazentation, fetaler Wachstumsrestriktion und schwangerschaftsassoziierter metabolischer Phänotypen untersucht.
Das Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Prl3d1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Prl3d1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Prl3d1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Placental lactogen Iα-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Prl3d1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Placental lactogen Iα-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Prl3d1-Exone abzielen, die für die Placental lactogen Iα-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Prl3d1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Placental lactogen Iα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Prl3d1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Placental lactogen Iα HDR-Plasmid (m) und Placental lactogen Iα HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Prl3d1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Prl3d1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.