Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) PiT1: sc-403121-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PiT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PiT1 Double Nickase (h) et le plasmide PiT1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC20A1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PiT1 | sc-403121-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PiT1 | sc-403121-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC20A1 code pour PiT1, un transporteur de phosphate inorganique (Pi) à haute affinité, dépendant du sodium, qui assure l’entrée de phosphate dans la cellule, indispensable à la synthèse d’ATP, au métabolisme des nucléotides et à la production des phospholipides membranaires. Au-delà du transport de solutés, PiT1 contribue à des programmes d’homéostasie du phosphate qui s’articulent avec les voies de signalisation prolifératives, l’adaptation métabolique et la progression du cycle cellulaire dans divers types cellulaires. Des altérations de l’activité de SLC20A1/PiT1 ont été étudiées dans des contextes tels que les troubles de la gestion des minéraux, les processus associés à la calcification et des phénotypes sensibles au phosphate pertinents pour le cancer et le remodelage tissulaire. Ces caractéristiques font de PiT1 un nœud utile pour des études mécanistiques de la signalisation induite par le phosphate et du contrôle métabolique dans les cellules humaines.
PiT1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC20A1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC20A1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC20A1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC20A1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.