PIPK I α CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403490

개요

PIP5K1A는 인지질이노시톨-4-인산 5-키나아제 I형 알파(PIPK I α)를 암호화하며, 이는 세포막과 엔도막계(endomembranes)에서 포스파티딜이노시톨 4,5-비스인산(PI(4,5)P2)을 생성하는 핵심 지질 키나아제입니다. PI(4,5)P2의 가용성을 조절함으로써 PIPK I α는 액틴 세포골격 재구성, 클라트린 매개 엔도사이토시스, 포컬 어드히전(focal adhesion) 동역학, 그리고 PLC 및 PI3K와 같은 하위 경로로 수용체 신호를 연계하는 과정을 조절합니다. PIP5K1A 의존적 포스포이노시타이드 신호전달은 막 수송과 세포 이동에 영향을 미치며, 이러한 과정은 종양 생물학 및 침윤성 표현형에서 흔히 교란됩니다. 또한 PIP5K1A 활성의 변화는 성장인자 신호전달 이상 및 염증 반응의 조절 이상과도 연관되어 있어, 질병 관련 세포 행동의 기전을 연구하는 데 중요한 표적으로 여겨집니다.

PIPK I α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PIP5K1A 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PIP5K1A 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PIP5K1A의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PIPK I α 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PIPK I α 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PIP5K1A 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PIPK I α 기능에 중요한 PIP5K1A 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PIP5K1A 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PIPK I α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PIPK I α CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PIP5K1A 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PIPK I α HDR 플라스미드 (h) 및 PIPK I α HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PIP5K1A 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PIP5K1A 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.