PGC1a Lentiviral Activation Particles (h): sc-400070-LAC

PPARGC1A kodiert den transkriptionellen Koaktivator PGC1α, einen zentralen Regulator der mitochondrialen Biogenese und des oxidativen Stoffwechsels, der nukleäre respiratorische Faktoren, PPAR-Signalwege und antioxidative Genprogramme koordiniert. PGC1α integriert Signale von AMPK und SIRT1, um die Energienutzung umzubauen, die Fettsäureoxidation zu fördern und glukoneogene sowie thermogene Transkriptionsnetzwerke zelltypspezifisch feinzujustieren. Eine veränderte PPARGC1A-Aktivität wurde mit metabolischer Fehlregulation, mitochondrialer Dysfunktion und Stressantworten in Verbindung gebracht, die für Insulinresistenz, Neurodegeneration und kardiometabolische Phänotypen relevant sind. In humanen Zellmodellen wird PPARGC1A häufig untersucht, um die transkriptionelle Kontrolle der Atmung, den Umgang mit reaktiven Sauerstoffspezies und adaptive Antworten auf Nährstoff- und trainingsähnliche Signalgebung zu analysieren.

PGC1a Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PPARGC1A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PGC1a Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PPARGC1A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PGC1a-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PPARGC1A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.