PFKL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402662

개요

PFKL은 해당과정에서 과당-6-인산을 과당-1,6-이인산으로 전환하는 반응을 촉매하는 핵심 속도 제한 효소인 포스포프룩토키나아제-1(PFK-1)의 간(간장) 아이소폼을 암호화합니다. PFKL은 세포의 에너지 상태와 대사체 상태로부터의 알로스테릭 신호를 통합함으로써, 해당계 플럭스를 생합성 요구와 산화환원 균형에 맞게 조율하는 데 기여합니다. PFKL의 활성 및 발현 변화는 증식 상태에서의 대사 재프로그래밍과 연관되어 있으며, 포도당 이용, 젖산 생성, 그리고 하위 탄소 흐름 경로의 변화에 기여하는 것으로 보고되었습니다. 해당과정의 중심 노드로서 PFKL은 에너지 항상성, 스트레스 적응, 그리고 질병 관련 표현형과 연관된 대사 의존성을 다루는 연구에서 자주 조사됩니다.

PFKL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PFKL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PFKL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PFKL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PFKL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PFKL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PFKL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PFKL 기능에 중요한 PFKL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PFKL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PFKL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PFKL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PFKL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PFKL HDR 플라스미드 (h) 및 PFKL HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PFKL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PFKL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.