PELP1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-429042

Übersicht

PELP1 (prolin-, glutamat- und leucinreiches Protein 1), kodiert durch das Mausgen *Pelp1*, ist ein multifunktionaler nukleärer Rezeptor-Koregulator und ein chromatinassoziiertes Scaffold-Protein, das die Steroidhormonsignalgebung mit transkriptioneller und epigenetischer Kontrolle verknüpft. Es koordiniert Wechselwirkungen zwischen der Östrogenrezeptor-Signalgebung und Chromatin-Remodeling-Komplexen und beeinflusst dadurch die RNA-Polymerase-II-abhängige Transkription, Histonmodifikationen und den Zellzyklus. PELP1 interagiert zudem mit Kinase-Signalwegen und DNA-Schadensantworten und verbindet so Wachstumsfaktor-Signale mit Genexpressionsprogrammen und der Aufrechterhaltung der Genomintegrität. Eine fehlregulierte PELP1-Aktivität und -Lokalisierung wird mit aberranter Proliferation, veränderter endokriner Signalgebung und onkogenen transkriptionellen Netzwerken in Verbindung gebracht, was PELP1 für mechanistische Studien zur hormonresponsiven Biologie und zu tumorassoziierten Signalwegen relevant macht.

Das PELP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Pelp1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Pelp1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Pelp1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PELP1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Pelp1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PELP1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Pelp1-Exone abzielen, die für die PELP1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Pelp1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PELP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PELP1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Pelp1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PELP1 HDR-Plasmid (m) und PELP1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Pelp1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Pelp1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.