PDGF-C CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401977

Übersicht

PDGFC kodiert den von Thrombozyten abgeleiteten Wachstumsfaktor C (PDGF‑C), einen sezernierten Wachstumsfaktor, der proteolytisch aktiviert wird und seine Signale überwiegend über PDGF‑Rezeptorkomplexe vermittelt, um die Proliferation und Migration mesenchymaler Zellen sowie das Remodeling der extrazellulären Matrix zu regulieren. PDGF‑C trägt zur parakrinen Kommunikation zwischen stromalen und epithelialen Kompartimenten bei und aktiviert nachgeschaltete Signalwege wie PI3K–AKT und MAPK/ERK, die Gewebeentwicklung und -reparatur koordinieren. Eine fehlregulierte PDGF‑C‑Signalübertragung wird in verschiedenen Krankheitskontexten mit aberranter Angiogenese, fibrosebedingtem Remodeling und Tumor‑Stroma‑Interaktionen in Verbindung gebracht. Daher wird PDGFC häufig in Modellen der Gefäßbiologie, der Wundheilung, entzündlicher Mikroumgebungen und des Crosstalks onkogener Signalwege untersucht.

Das PDGF-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PDGFC-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PDGFC-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PDGFC nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PDGF-C-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PDGFC-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PDGF-C-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PDGFC-Exone abzielen, die für die PDGF-C-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PDGFC-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PDGF-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PDGF-C CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PDGFC-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PDGF-C HDR-Plasmid (h) und PDGF-C HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PDGFC-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PDGFC-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.