PCTAIRE-3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404867-LAC

CDK18 kodiert die Serin/Threonin-Kinase PCTAIRE-3, ein Mitglied der cyclinabhängigen Kinasefamilie, das an der Regulation des Zellzyklusfortschritts und phosphorylierungsabhängiger Signalwege in proliferierenden Zellen beteiligt ist. Die Aktivität von CDK18 wurde mit der Aufrechterhaltung der Genomstabilität und Netzwerken der DNA-Schadensantwort in Verbindung gebracht, einschließlich Prozessen, die Replikationsstress und Checkpoint-Kontrolle beeinflussen. Eine veränderte Expression oder Funktion von CDK18 wurde mit aberranten Proliferationsphänotypen assoziiert und im Kontext der Krebsbiologie sowie anderer Erkrankungen untersucht, bei denen Zellzyklus- und Reparaturwege dysreguliert sind. Als Modulator kinasegetriebener Schaltkreise stellt CDK18 einen nützlichen Knotenpunkt dar, um das Crosstalk zwischen Cyclin/CDK-Regulation, Stresssignalgebung und Transkriptionsprogrammen zu untersuchen.

PCTAIRE-3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CDK18-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

PCTAIRE-3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CDK18-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen PCTAIRE-3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CDK18-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.