Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PCMT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418153-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PCMT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PCMT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PCMT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PCMT1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PCMT1 Anticorpo (D-E7): sc-100977
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PCMT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418153-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PCMT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418153-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PCMT1 codifica a proteína O-metiltransferase 1 de L-isoaspartato proteico (D-aspartato), uma enzima de reparo dependente de SAM que metila resíduos anômalos de isoaspartil resultantes da desamidação espontânea ou isomerização de asparagina e aspartato. Essa atividade de controle de qualidade proteica dá suporte à proteostase ao facilitar a conversão de resíduos danificados de volta na direção do aspartato normal e ao limitar o acúmulo, associado ao envelhecimento, de proteínas disfuncionais. A função de PCMT1 se relaciona com respostas celulares ao estresse, turnover proteico e manutenção da integridade de enzimas e de proteínas do citoesqueleto sob estresse oxidativo e metabólico. Alterações na atividade de PCMT1 têm sido implicadas na vulnerabilidade neuronal e em fenótipos relacionados a dano proteico, tornando-a relevante para estudos de neurobiologia, envelhecimento e mecanismos de adaptação ao estresse.
PCMT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PCMT1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PCMT1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PCMT1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PCMT1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.