PCID2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406324

Übersicht

PCID2 (PCI Domain Containing 2) kodiert ein PCI-Domänenprotein, das an der Assemblierung und Regulation großer Multiproteinkomplexe beteiligt ist, die den RNA-Stoffwechsel und die Kontrolle der Genexpression koordinieren. PCID2 wird mit posttranskriptionellen Regulationsprozessen in Verbindung gebracht, darunter mRNA-Überwachung und -Abbau, und wird im Kontext von proteostaseassoziierten Signalwegen untersucht, die die zelluläre Homöostase prägen. Störungen dieser Prozesse können den Zellzyklus, Stressantworten und Differenzierungsprogramme beeinflussen, indem sie die Stabilität von Transkripten und die Proteinproduktion verändern. Fehlregulierte RNA-Prozessierungs- und Qualitätskontrollnetzwerke sind häufig mit onkogenen Zuständen und anderen komplexen Erkrankungen assoziiert, was PCID2 zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Studien der genregulatorischen Schaltkreise macht.

Das PCID2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des PCID2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des PCID2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von PCID2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PCID2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von PCID2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PCID2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf PCID2-Exone abzielen, die für die PCID2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere PCID2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PCID2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom PCID2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des PCID2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PCID2 HDR-Plasmid (h) und PCID2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von PCID2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten PCID2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.