PBEF Lentiviral Activation Particles (m): sc-425569-LAC

マウスNampt（PBEF／ビスファチンとしても知られる）は、ニコチンアミドをNMNへと変換して細胞内NADプールを維持するNADサルベージ経路の律速酵素であるニコチンアミド・ホスホリボシルトランスフェラーゼ（NAMPT）をコードしています。NADの利用可能性を制御することで、NAMPTはサーチュインおよびPARP依存性プログラムを調節し、ミトコンドリア代謝、酸化ストレス応答、DNA修復、炎症シグナル伝達に影響を与えます。NAMPT活性は栄養感知と転写・エピジェネティック制御を結び付け、免疫細胞の活性化、脂肪組織の生物学、細胞のストレス適応などの過程に影響します。NAMPT／NAD代謝の破綻は、代謝機能障害、神経炎症状態、腫瘍細胞におけるバイオエネルギーの再配線と関連付けられており、マウスモデルにおける機構研究の有用な標的（ノード）となっています。

PBEF レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なNamptの発現上昇を可能にします。

PBEF レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Nampt転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性PBEFの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のNamptゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。