Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Pax-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422119
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Pax-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Pax-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Pax-6 Anticorpo (PAX6): sc-81649
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Pax-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422119 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Pax6 de camundongo codifica o fator de transcrição Pax-6, que contém o domínio paired box e atua como um regulador mestre do desenvolvimento ocular e do sistema nervoso central, controlando a especificação de linhagens, a neurogênese e o padrão de organização dos tecidos. O Pax-6 liga-se a elementos intensificadores (enhancers) para coordenar programas de expressão gênica que regem a proliferação e a diferenciação de células progenitoras, integrando-se a redes de sinalização do desenvolvimento, incluindo as vias Wnt, SHH e FGF. Em tecidos maduros, o Pax-6 contribui para a manutenção da identidade neuronal e para a regulação de genes endócrinos pancreáticos, sustentando a homeostase da glicose. A atividade ou a dosagem desregulada de Pax6 está fortemente associada a malformações oculares congênitas e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando-o um alvo central para estudos mecanísticos de circuitos regulatórios gênicos do desenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Pax-6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pax6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pax6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pax6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Pax-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pax6 para a investigação da sinalização de Pax-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pax6 críticos para a função Pax-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pax6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Pax-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Pax-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pax6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Pax-6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Pax-6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pax6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pax6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.