Plásmido Doble Nickase (h) PATZ1: sc-404881-NIC

PATZ1 (proteína 1 con dedos de zinc que contiene motivos POZ/BTB y AT-hook) es un factor de transcripción nuclear que se une a ADN rico en AT mediante motivos de dedos de zinc y AT-hook, y regula programas de expresión génica que controlan la proliferación, la diferenciación y la apoptosis. Funciona dentro de redes reguladoras asociadas a la cromatina modulando la represión y la activación transcripcional, incluido el crosstalk con respuestas dependientes de p53 y otros circuitos transcripcionales del desarrollo. La expresión o actividad desregulada de PATZ1 se ha vinculado con alteraciones en las decisiones de destino celular y en la estabilidad genómica, con asociaciones reportadas en múltiples contextos tumorales y fenotipos del neurodesarrollo. Estas propiedades hacen de PATZ1 una diana útil para analizar el control transcripcional, la especificación de linaje y las vías de respuesta al estrés en modelos celulares humanos.

PATZ1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PATZ1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PATZ1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PATZ1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PATZ1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.