PAK5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404073

Descripción general

PAK5 (quinasa 5 activada por p21) es una quinasa de serina/treonina activada aguas abajo de las GTPasas de la familia Rho, como Cdc42 y Rac, que integra señales que regulan la remodelación del citoesqueleto, el crecimiento de neuritas y la supervivencia celular. Se localiza en mitocondrias y otros compartimentos subcelulares donde puede influir en la señalización relacionada con la apoptosis y en las respuestas al estrés. PAK5 participa en vías que gobiernan la motilidad y la polaridad celulares mediante la fosforilación de intermediarios del citoesqueleto y de la señalización, vinculando señales extracelulares con cambios en la adhesión y la migración. La actividad o expresión desregulada de PAK5 se ha asociado con fenotipos de proliferación aberrante, invasión y resistencia a terapias en múltiples contextos de cáncer, y también es relevante en neurobiología por sus funciones en el desarrollo neuronal y la función sináptica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PAK5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PAK5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PAK5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PAK5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PAK5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PAK5 para la investigación de la señalización de PAK5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PAK5 críticos para la función de PAK5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PAK5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PAK5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PAK5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PAK5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PAK5 (h) y el plásmido HDR PAK5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PAK5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PAK5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.