P4HA1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407173

개요

P4HA1은 프롤릴 4-하이드록실레이스(prolyl 4-hydroxylase)의 촉매적 알파 소단위를 암호화하며, 이는 소포체(ER)에 상주하는 핵심 효소로서 프로콜라겐의 프롤린 잔기를 하이드록실화하여 삼중 나선의 안정성과 세포외기질(ECM) 성숙을 돕습니다. 콜라겐의 생합성과 침착을 조절함으로써 P4HA1은 기질 재형성, 세포–기질 접착, 조직 경직도에 영향을 미치며, 이러한 과정은 저산소 반응 프로그램 및 대사 적응과 맞물립니다. P4HA1 활성의 변화는 섬유화 표현형 및 종양 미세환경 재형성과 연관되어 왔는데, 이때 세포외기질의 조직화는 침윤과 기질(스트로마) 신호전달에 영향을 줄 수 있습니다. 그 결과 P4HA1은 콜라겐 섬유형성, 소포체 단백질 처리, 그리고 기질 중심의 세포 행동 조절과 관련된 경로에서 자주 연구됩니다.

P4HA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 P4HA1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 P4HA1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 P4HA1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P4HA1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P4HA1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 P4HA1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P4HA1 기능에 중요한 P4HA1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 P4HA1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P4HA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 P4HA1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 P4HA1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P4HA1 HDR 플라스미드 (h) 및 P4HA1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 P4HA1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 P4HA1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.