p300 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400055-LAC

Das humane Gen **EP300** kodiert **p300**, eine multifunktionale Lysin-Acetyltransferase und transkriptionellen Koaktivator, der Signale verschiedener Transkriptionsfaktoren integriert, um die Chromatinzugänglichkeit und Genexpressionsprogramme zu regulieren. p300 acetyliert Histone und Nicht-Histon-Substrate und ist an zentralen Signalwegen beteiligt, die Zellzyklusprogression, DNA-Schadensantworten, Differenzierung, Stoffwechsel und Immun-Signalisierung steuern – häufig in Koordination mit CREB, p53, NF-κB und nukleären Rezeptoren. Über seine Rolle bei der Regulation von Enhancern und Promotoren trägt p300 zur Ausprägung linien-/zelltypspezifischer Transkription sowie zu stressadaptiven Antworten bei. Eine Fehlregulation der EP300/p300-Aktivität oder -Expression wird mit onkogenen Transkriptionszuständen und weiteren Erkrankungen in Verbindung gebracht, bei denen Chromatinregulation und transkriptionelle Kontrolle verändert sind.

p300 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente EP300-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

p300 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der EP300-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen p300-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen EP300-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.