osteopontin/OPN/SPP1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423134-LAC

Maus‑Spp1 kodiert Osteopontin (OPN/SPP1), ein sezerniertes Phosphoglykoprotein, das als matrizellulärer Regulator der Zelladhäsion, -migration und des Zellüberlebens über die Bindung an Integrine und CD44 wirkt. Die OPN‑Signalübertragung greift in die Dynamik fokaler Adhäsionen, das Zytoskelett‑Remodeling und nachgeschaltete Kinasewege einschließlich FAK/Src, PI3K–AKT und MAPK ein und prägt dadurch die Rekrutierung von Immunzellen sowie die inflammatorische Polarisierung. In Kontexten des Gewebeumbaus trägt Spp1 zur Organisation der extrazellulären Matrix, zur Osteoklastenaktivität und zu fibrosisassoziierten Myofibroblasten‑Programmen bei. Eine dysregulierte OPN‑Expression wird breit als molekularer Readout und mechanistischer Knotenpunkt in Modellen chronischer Entzündung, Tumor‑Stroma‑Interaktionen, metabolischer Erkrankungen und Neuroinflammation genutzt.

osteopontin/OPN/SPP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Spp1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

osteopontin/OPN/SPP1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Spp1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen osteopontin/OPN/SPP1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Spp1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.