Plasmide Double Nickase (h) OPN1SW: sc-400755-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) OPN1SW correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide OPN1SW Double Nickase (h) et le plasmide OPN1SW Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OPN1SW. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) OPN1SW | sc-400755-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) OPN1SW | sc-400755-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OPN1SW code l’opsine 1 sensible aux courtes longueurs d’onde, un photopigment des cônes qui se lie au 11‑cis‑rétinal pour former le pigment visuel sensible au bleu dans les segments externes des cônes rétiniens. Après absorption d’un photon, OPN1SW active la cascade de phototransduction des cônes via la signalisation de la transducine et de la phosphodiestérase, abaissant le taux de GMPc afin de moduler les canaux cationiques activés par les nucléotides cycliques et de façonner l’hyperpolarisation membranaire. Cette voie s’articule avec le trafic du segment externe, la régénération du chromophore et les processus d’adaptation à la lumière, coordonnés par le soutien de l’épithélium pigmentaire rétinien. Des variations génétiques ou une dérégulation affectant la fonction d’OPN1SW ont été associées à des différences de sensibilité spectrale des cônes et peuvent contribuer à des phénotypes de vision des couleurs pertinents pour la recherche sur les maladies rétiniennes héréditaires.
OPN1SW Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OPN1SW dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OPN1SW. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OPN1SW. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OPN1SW.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.