Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Op18: sc-401656-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Op18 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Op18 Double Nickase (h) et le plasmide Op18 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant STMN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Op18 Antibody (E-3): sc-55531
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Op18 | sc-401656-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Op18 | sc-401656-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
STMN1 code la stathmine/oncoprotéine 18 (Op18), une phosphoprotéine cytosolique qui se lie aux hétérodimères de tubuline et favorise la catastrophe des microtubules, ajustant ainsi l’assemblage du fuseau, la progression mitotique et le trafic intracellulaire. Son activité est régulée par phosphorylation en aval de nœuds de signalisation incluant MAPK et PI3K/AKT, reliant les signaux des facteurs de croissance à la dynamique du cytosquelette et au contrôle du cycle cellulaire. Une expression dérégulée de STMN1 est fréquemment associée à des phénotypes prolifératifs et invasifs en cancérologie, et a également été liée à une altération de la stabilité des microtubules neuronaux dans des modèles de neurodégénérescence. Par conséquent, STMN1 est largement étudié dans les voies contrôlant la mitose, la migration et les réponses au stress qui remodèlent le réseau de microtubules.
Op18 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus STMN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de STMN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de STMN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de STMN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.