OLIG2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2): sc-400670-KO-2

Übersicht

OLIG2 kodiert einen basischen Helix-Loop-Helix-Transkriptionsfaktor, der die neuronale Entwicklung steuert, indem er die Linienfestlegung und Differenzierung von Oligodendrozytenvorläufern und Motoneuronvorläufern reguliert. In Zusammenarbeit mit entwicklungsbiologischen Signalinputs wie Sonic hedgehog und Notch kontrolliert OLIG2 Genexpressionsprogramme, die den Zellzyklus, den Chromatinzustand und die Festlegung auf eine gliale Zellidentität im zentralen Nervensystem beeinflussen. Eine fehlregulierte OLIG2-Expression und veränderte nachgeschaltete transkriptionelle Netzwerke werden mit der Biologie maligner Gliome in Verbindung gebracht, darunter Verschiebungen hin zu vorläuferähnlichen Zuständen und mit Resistenz assoziierte zelluläre Programme. Diese Eigenschaften machen OLIG2 zu einem nützlichen Ziel für die Untersuchung neuroentwicklungsbezogener transkriptioneller Schaltkreise und tumorassoziierter Linienplastizität.

Das OLIG2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des OLIG2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des OLIG2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von OLIG2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die OLIG2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von OLIG2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der OLIG2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf OLIG2-Exone abzielen, die für die OLIG2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere OLIG2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom OLIG2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom OLIG2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des OLIG2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das OLIG2 HDR-Plasmid (h) und OLIG2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von OLIG2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten OLIG2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.