OLFM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406216
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OLFM3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico OLFM3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:OLFM3 Anticorpo (M-N16): sc-100795
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OLFM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406216 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
OLFM3 (olfactomedina 3) codifica uma glicoproteína secretada da família de domínios olfactomedina, que se localiza no espaço extracelular e participa de interações célula–célula e célula–matriz. O OLFM3 tem sido associado à modulação de sinais imunes e inflamatórios em microambientes teciduais e está relacionado a processos como organização da matriz extracelular, adesão celular e regulação do comportamento de células mieloides. Alterações na expressão de OLFM3 foram relatadas em múltiplos contextos de doença, incluindo biologia do câncer e condições inflamatórias, nas quais podem correlacionar-se com mudanças na comunicação entre tumor e sistema imune e no remodelamento estromal. Essas características tornam o OLFM3 um alvo útil para estudos mecanísticos de sinalização do microambiente e de redes regulatórias extracelulares.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OLFM3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene OLFM3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do OLFM3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do OLFM3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OLFM3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de OLFM3 para a investigação da sinalização de OLFM3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) OLFM3 críticos para a função OLFM3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos OLFM3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo OLFM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OLFM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus OLFM3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo OLFM3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OLFM3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia OLFM3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo OLFM3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.