OLFM3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406216

Descripción general

OLFM3 (olfactomedina 3) codifica una glicoproteína secretada de la familia de dominios olfactomedina que se localiza en el espacio extracelular y participa en interacciones célula–célula y célula–matriz. OLFM3 se ha vinculado con la modulación de la señalización inmunitaria e inflamatoria en microambientes tisulares y se asocia con procesos como la organización de la matriz extracelular, la adhesión celular y la regulación del comportamiento de las células mieloides. Se ha descrito una expresión alterada de OLFM3 en múltiples contextos patológicos, incluida la biología del cáncer y las enfermedades inflamatorias, donde puede correlacionarse con cambios en el diálogo cruzado tumor–inmunidad y la remodelación del estroma. Estas características convierten a OLFM3 en una diana útil para estudios mecanísticos de la señalización del microambiente y de las redes reguladoras extracelulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OLFM3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen OLFM3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del OLFM3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de OLFM3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OLFM3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en OLFM3 para la investigación de la señalización de OLFM3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de OLFM3 críticos para la función de OLFM3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de OLFM3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OLFM3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OLFM3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus OLFM3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OLFM3 (h) y el plásmido HDR OLFM3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología OLFM3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana OLFM3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.