OGFRL1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407392

Übersicht

OGFRL1 (opioid growth factor receptor-like 1) kodiert ein rezeptorähnliches Protein, das mit der Familie der Opioid-Wachstumsfaktor-Rezeptoren verwandt ist, und soll an regulatorischen Netzwerken beteiligt sein, die extrazelluläre Signale mit der intrazellulären Kontrolle von Zellwachstum und Überleben verknüpfen. Obwohl der genaue molekulare Mechanismus bislang nicht vollständig geklärt ist, wurde OGFRL1 mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die Proliferation, Differenzierung und Gewebehomöostase steuern – Prozesse, die während der onkogenen Transformation und der Anpassung an das Mikromilieu häufig umgestaltet werden. Veränderte OGFRL1-Expressionsmuster wurden in transkriptomischen Studien über mehrere Krankheitskontexte hinweg berichtet, was seine Nutzung als Kandidatenmodulator bei Zellzustandsübergängen stützt. Daher ist OGFRL1 von Interesse, um Signalweg-Crosstalk zu untersuchen, der Wachstumskontrolle, Stressantworten und zelluläre Plastizität beeinflusst.

Das OGFRL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des OGFRL1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des OGFRL1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von OGFRL1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die OGFRL1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von OGFRL1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der OGFRL1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf OGFRL1-Exone abzielen, die für die OGFRL1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere OGFRL1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom OGFRL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom OGFRL1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des OGFRL1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das OGFRL1 HDR-Plasmid (h) und OGFRL1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von OGFRL1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten OGFRL1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.