ODCp Double Nickase Plasmid (h): sc-410634-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ODCp Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ODCp Double-Nickase-Plasmid (h) und ODCp Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf AZIN2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ODCp Double Nickase Plasmid (h) | sc-410634-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ODCp Double Nickase Plasmid (h2) | sc-410634-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **AZIN2** kodiert das **Ornithin-Decarboxylase-Paralog (ODCp)**, einen Regulator des Polyamin-Stoffwechselwegs, der die zellulären Spiegel von Putrescin, Spermidin und Spermine moduliert, indem er mit der antizymabhängigen Kontrolle der Decarboxylase-Aktivität und ihres Abbaus interagiert. Über diese Regulation trägt AZIN2 zur Polyamin-Homöostase bei und beeinflusst grundlegende Prozesse wie Translation, Zellzyklusprogression, vesikulären Transport und Differenzierung. Eine dysregulierte Polyaminmetabolik ist häufig mit veränderter Proliferation und Stressantworten verknüpft, wodurch AZIN2/ODCp für die Untersuchung metabolischer Umprogrammierung und der Kontrolle von Wachstum in krankheitsassoziierten zellulären Zuständen relevant ist. Die Expression von AZIN2 wurde zudem mit spezialisierten sekretorischen Phänotypen in ausgewählten Geweben in Verbindung gebracht, was die Untersuchung der polyaminabhängigen Regulation von Sekretion und zellulärer Reifung unterstützt.
ODCp Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des AZIN2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von AZIN2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die AZIN2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit AZIN2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.