OATP-F Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405736

Descripción general

SLCO1C1 codifica el polipéptido transportador de aniones orgánicos humano OATP-F (OATP1C1), un transportador de solutos de la membrana plasmática que media la captación de hormonas tiroideas e iodotironinas relacionadas de forma independiente del sodio, con alta afinidad por la tiroxina (T4) y la triyodotironina inversa (rT3). Este transportador participa de manera destacada en el control de la disponibilidad hormonal en barreras tisulares, incluida la barrera hematoencefálica, influyendo así en la homeostasis local de las hormonas tiroideas y en los programas transcripcionales posteriores regulados por los receptores de hormona tiroidea. Al modular el flujo intracelular de iodotironinas, OATP-F se integra con la señalización endocrina, la regulación metabólica y las vías de manejo de xenobióticos que dependen de un acceso controlado de sustratos mediado por transportadores. La actividad o expresión alterada del transportador es relevante para la investigación sobre la regulación neuroendocrina y los trastornos vinculados a una distribución y señalización de hormonas tiroideas alteradas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO OATP-F (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLCO1C1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLCO1C1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLCO1C1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína OATP-F.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLCO1C1 para la investigación de la señalización de OATP-F, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLCO1C1 críticos para la función de OATP-F
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLCO1C1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido OATP-F CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido OATP-F CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLCO1C1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR OATP-F (h) y el plásmido HDR OATP-F (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLCO1C1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLCO1C1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.