NYNRIN CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-410066

概要

NYNRIN は、NYN 領域およびレトロウイルスインテグラーゼ様領域を含むと報告されている大型の多ドメインタンパク質をコードしており、核酸あるいはタンパク質複合体との相互作用との関連が示唆されています。ただし、ヒト細胞における正確な分子機能は依然として十分には解明されていません。トランスクリプトーム研究により、NYNRIN の発現は発生・分化プログラムや、特定組織における細胞恒常性の制御と関連づけられてきました。NYNRIN の発現変動は複数の疾患状況で観察されており、遺伝子発現ネットワークの破綻を検討するための候補因子としての有用性を支持します。比較的研究が進んでいない遺伝子であることから、NYNRIN はしばしば、経路の結び付き、細胞状態の遷移、ならびに注釈の乏しい調節因子を撹乱した際に現れる表現型を定義する目的で探索されています。

NYNRIN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNYNRIN遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NYNRIN内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NYNRINのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NYNRINタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NYNRINシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NYNRIN欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NYNRINの機能に不可欠なNYNRINエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NYNRINゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NYNRIN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNYNRIN CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NYNRIN遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NYNRIN HDRプラスミド（h）および NYNRIN HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNYNRINホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNYNRIN標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。