Nup37 Lentiviral Activation Particles (h): sc-409458-LAC

NUP37 kodiert Nup37, eine Kernkomponente des Nup107–160-Subkomplexes des Kernporenkomplexes, der den Aufbau der Kernhülle sowie den nukleozytoplasmatischen Transport von Proteinen und RNAs unterstützt. Durch seinen Beitrag zur Architektur des NPC hilft Nup37, die Zellzyklusprogression, mitotische Ereignisse und die Genomregulation über den kontrollierten Transport von Transkriptionsfaktoren und Signalvermittlern zu koordinieren. Veränderungen in der Zusammensetzung der Kernpore werden häufig mit einer veränderten Chromatinorganisation und Stressantwort-Signalgebung in Verbindung gebracht, was NUP37 zu einem geeigneten Ansatzpunkt macht, um transportabhängige Regulation von Proliferation und Differenzierung zu untersuchen. Eine dysregulierte Expression oder Abhängigkeit von Nukleoporin-Funktionen wurde in mehreren Tumorkontexten berichtet, was Forschung zu Verwundbarkeiten des nuklearen Transports und zur Neuverdrahtung von Signalwegen stützt, ohne eine therapeutische Anwendung zu implizieren.

Nup37 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NUP37-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Nup37 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NUP37-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Nup37-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NUP37-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.