Nup37 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-409458

Übersicht

NUP37 kodiert Nup37, eine essenzielle Komponente des Nup107–160-Subkomplexes des Kernporenkomplexes, der die Integrität der Kernhülle und den selektiven nukleozytoplasmatischen Transport gewährleistet. Durch seinen Beitrag zur Assemblierung und zum Gating der Kernpore beeinflusst Nup37 den RNA-Export, den Proteinimport sowie die räumliche Regulation von Transkriptionsprogrammen, die von einem korrekt funktionierenden nukleären Transport abhängen. Störungen in der Zusammensetzung der Kernpore können die Genomstabilität und das Fortschreiten der Mitose beeinträchtigen – Prozesse, die in proliferativen Krankheitskontexten häufig verändert sind. Daher wird NUP37 häufig in Signalwegen untersucht, die nukleären Transport, Zellzykluskontrolle und stressresponsive Signalübertragung miteinander verknüpfen.

Das Nup37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NUP37-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NUP37-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NUP37 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Nup37-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NUP37-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Nup37-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NUP37-Exone abzielen, die für die Nup37-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NUP37-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Nup37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Nup37 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NUP37-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Nup37 HDR-Plasmid (h) und Nup37 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NUP37-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NUP37-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.