Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO NUB1 (m): sc-424677
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- NUB1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique NUB1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NUB1 Antibody (F-10): sc-377003
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO NUB1 (m) | sc-424677 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Nub1 (NEDD8 ultimate buster 1) code NUB1, une protéine induite par l’interféron qui se lie au modificateur de type ubiquitine NEDD8 et favorise l’élimination, dépendante du protéasome, des substrats conjugués à NEDD8. En régulant la dynamique de la neddylation et le renouvellement des protéines associées aux ligases E3 de type cullin-RING, NUB1 influence l’homéostasie du système ubiquitine–protéasome, la progression du cycle cellulaire et les réponses cellulaires au stress. NUB1 interagit aussi avec des protéines de type ubiquitine telles que FAT10, reliant la signalisation de l’immunité innée à la dégradation protéique régulée. La dérégulation de ces voies est fréquemment impliquée dans des déséquilibres de la protéostase et des phénotypes de signalisation inflammatoire, ce qui fait de Nub1 un nœud utile pour des études mécanistiques dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO NUB1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Nub1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Nub1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Nub1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine NUB1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Nub1 pour l'étude de la signalisation de NUB1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Nub1 essentiels à la fonction de NUB1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Nub1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le NUB1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le NUB1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Nub1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le NUB1 plasmide HDR (m) et le NUB1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Nub1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Nub1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.