NTR2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405783

Übersicht

Neurotensinrezeptor 2 (NTSR2, NTR2) ist ein G‑Protein‑gekoppelter Rezeptor der Klasse A, der das Neuropeptid Neurotensin bindet und überwiegend an Gαq/11 koppelt, um die Phospholipase‑C‑Signalübertragung, die Mobilisierung von intrazellulärem Calcium und nachgeschaltete Kinasekaskaden wie PKC–MAPK/ERK zu aktivieren. Die NTR2‑Signalgebung beeinflusst die neuronale Erregbarkeit, die synaptische Transmission und neuroendokrine Antworten und kann Crosstalk mit Dopamin‑ und Glutamat‑Signalwegen modulieren, die die Aktivität auf Netzwerkebene prägen. In nicht‑neuronalen Kontexten wurde die Expression von NTSR2 mit inflammatorischer Signalgebung und zellulären Stressantworten in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für Studien zu Neuroinflammation und Gewebeumbau unterstreicht. Eine fehlregulierte Aktivität der Neurotensin‑NTR2‑Achse wird in der Biologie neurologischer und neuropsychiatrischer Erkrankungen sowie in Mechanismen untersucht, die in krankheitsassoziierten Modellen zu veränderter Zellproliferation und ‑überlebensfähigkeit beitragen.

Das NTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NTSR2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NTSR2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NTSR2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NTR2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NTSR2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NTR2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NTSR2-Exone abzielen, die für die NTR2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NTSR2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom NTR2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NTSR2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NTR2 HDR-Plasmid (h) und NTR2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NTSR2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NTSR2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.