NPR-C Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421949

Descripción general

El gen Npr3 de ratón codifica el receptor C de péptidos natriuréticos (NPR-C), un receptor de membrana que se une a ANP, BNP y CNP para regular su disponibilidad y la señalización posterior. El NPR-C se caracteriza ampliamente como un receptor de depuración que modula la señalización de cGMP impulsada por péptidos natriuréticos al controlar el recambio de los ligandos, influyendo así en el tono vascular, el remodelado cardíaco, el manejo renal de sodio y la homeostasis de líquidos. Más allá de la depuración de péptidos, el NPR-C se ha relacionado con la señalización asociada a Gi/adenilil ciclasa y con la endocitosis mediada por receptores en múltiples tipos celulares. La desregulación de las vías mediadas por NPR-C se ha asociado con fenotipos cardiometabólicos y cardiovasculares, lo que convierte a Npr3 en una diana útil para estudios mecanísticos sobre la regulación de la presión arterial y el remodelado tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NPR-C (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Npr3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Npr3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Npr3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NPR-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Npr3 para la investigación de la señalización de NPR-C, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Npr3 críticos para la función de NPR-C
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Npr3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NPR-C CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NPR-C CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Npr3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NPR-C (m) y el plásmido HDR NPR-C (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Npr3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Npr3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.