Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Notch 4 (m): sc-421934
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Notch 4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Notch 4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Notch 4 Antibody (A-12): sc-393893
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Notch 4 (m) | sc-421934 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Notch4 code un récepteur transmembranaire à passage unique de la famille Notch, qui assure une signalisation dépendante du contact contrôlant les décisions de destinée cellulaire, la prolifération et la différenciation. Lors de la liaison à un ligand de type Delta-like ou Jagged, la protéolyse du récepteur libère le domaine intracellulaire de Notch, lequel régule des programmes transcriptionnels en coordination avec RBPJ/CSL et des coactivateurs. Dans les tissus murins, Notch4 est fortement associé à la biologie vasculaire et endothéliale, en influençant le comportement angiogénique et la maturation des vaisseaux via des interactions avec des voies telles que VEGF, Wnt et TGF-β. Une signalisation Notch4 dérégulée a été associée à un remodelage vasculaire aberrant et à l’angiogenèse liée aux tumeurs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des réseaux de signalisation du développement et des maladies.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Notch 4 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Notch4 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Notch4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Notch4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Notch 4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Notch4 pour l'étude de la signalisation de Notch 4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Notch4 essentiels à la fonction de Notch 4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Notch4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Notch 4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Notch 4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Notch4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Notch 4 plasmide HDR (m) et le Notch 4 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Notch4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Notch4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.