Plasmide Double Nickase (h) Nop14: sc-408567-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nop14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nop14 Double Nickase (h) et le plasmide Nop14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NOP14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nop14 Antibody (B-5): sc-398763
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nop14 | sc-408567-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **NOP14** code **Nop14**, une protéine nucléolaire requise pour la biogenèse des ribosomes, en particulier la maturation de la petite sous-unité ribosomique **40S** via le traitement des **pré‑ARNr** et l’assemblage de particules pré‑ribosomiques. En favorisant une production efficace de ribosomes, Nop14 influence le contrôle de la croissance cellulaire, la progression du cycle cellulaire et les voies de protéostase, étroitement couplées à la fonction du nucléole et aux réponses au stress. Une régulation altérée des facteurs de biogenèse des ribosomes, dont **NOP14**, a été étudiée dans le contexte d’une prolifération dérégulée et d’une instabilité génomique, ce qui en fait une cible pertinente pour des investigations mécanistiques en biologie du cancer et dans d’autres troubles liés à une dysfonction nucléolaire. **NOP14** est également utilisé comme nœud d’étude pour analyser comment des perturbations de l’assemblage ribosomal remanient les programmes globaux de traduction et les réseaux de signalisation en aval.
Nop14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NOP14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NOP14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NOP14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NOP14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.