Nop14 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-408567

Übersicht

NOP14 kodiert Nop14, ein nukleoläres Protein, das für die Ribosomenbiogenese und die Reifung der 18S‑rRNA durch Zusammenbau und Prozessierung der kleinen ribosomalen Untereinheit erforderlich ist. Es beteiligt sich an der Bildung prä‑ribosomaler Partikel und unterstützt die Organisation des Nukleolus, indem es die rRNA‑Prozessierung mit der Kontrolle des Zellwachstums und der Proteostase verknüpft. Eine Störung von NOP14 kann die Translationskapazität und nukleoläre Stressantworten beeinträchtigen – Prozesse, die mit der Zellzyklusregulation und p53‑assoziierten Checkpoints zusammenhängen. Veränderte Programme der Ribosomenbiogenese unter Beteiligung von NOP14 werden in proliferativen Erkrankungen und in der Krebsbiologie als Teil einer umfassenderen Fehlregulation der RNA‑Prozessierung und von Wachstumssignalen untersucht.

Das Nop14 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NOP14-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NOP14-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NOP14 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Nop14-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NOP14-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Nop14-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NOP14-Exone abzielen, die für die Nop14-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NOP14-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Nop14 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Nop14 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NOP14-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Nop14 HDR-Plasmid (h) und Nop14 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NOP14-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NOP14-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.