Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Nop14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-408567
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Nop14 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Nop14, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Nop14 Anticuerpo (B-5): sc-398763
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Nop14 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-408567 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
NOP14 codifica Nop14, una proteína nucleolar necesaria para la biogénesis ribosomal y la maduración del ARNr 18S mediante el ensamblaje y el procesamiento de la subunidad ribosomal pequeña. Participa en la formación de partículas preribosomales y contribuye a la organización del nucléolo, conectando el procesamiento del ARNr con el control del crecimiento celular y la proteostasis. La alteración de NOP14 puede perturbar la capacidad de traducción y las respuestas al estrés nucleolar, procesos que se entrecruzan con la regulación del ciclo celular y los puntos de control asociados a p53. Los programas alterados de biogénesis ribosomal en los que interviene NOP14 se han investigado en trastornos proliferativos y en biología del cáncer como parte de una desregulación más amplia del procesamiento de ARN y de la señalización del crecimiento.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nop14 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NOP14 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NOP14 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NOP14 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nop14.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NOP14 para la investigación de la señalización de Nop14, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de NOP14 críticos para la función de Nop14
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NOP14 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Nop14 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nop14 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NOP14. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nop14 (h) y el plásmido HDR Nop14 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NOP14 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NOP14 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.