Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NMD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406373
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NMD3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico NMD3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NMD3 Anticorpo (A-5): sc-515426
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NMD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406373 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O NMD3 codifica um fator essencial de biogênese ribossomal que atua como adaptador para a exportação das subunidades ribossomais pré-60S do núcleo para o citoplasma. Ao coordenar-se com a via de exportação CRM1/XPO1 e com eventos de remodelamento durante a fase final de maturação da subunidade 60S, o NMD3 ajuda a assegurar a montagem produtiva de ribossomos funcionalmente competentes para a tradução e a manutenção da proteostase. A perturbação da exportação ribossomal dependente de NMD3 pode desencadear respostas de estresse nucleolar e alterar a progressão do ciclo celular por efeitos a jusante sobre a tradução global. Como a biogênese ribossomal está intimamente ligada ao controle do crescimento, a regulação anômala desse processo é relevante para estudos de mecanismos de doença associados à proliferação e ao estresse, incluindo ribossomopatias e a reprogramação translacional associada ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NMD3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NMD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NMD3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NMD3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NMD3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NMD3 para a investigação da sinalização de NMD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NMD3 críticos para a função NMD3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NMD3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo NMD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NMD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NMD3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo NMD3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NMD3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NMD3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NMD3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.