Plasmide Double Nickase (m) nm23-H1: sc-421911-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) nm23-H1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide nm23-H1 Double Nickase (m) et le plasmide nm23-H1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nme1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: nm23-H1 Antibody (NM301): sc-465
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) nm23-H1 | sc-421911-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) nm23-H1 | sc-421911-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nme1 code pour nm23-H1, une nucléoside diphosphate kinase qui contribue à équilibrer les réserves cellulaires de NTP et soutient des processus dépendants de l’énergie tels que la dynamique du cytosquelette, le trafic vésiculaire et le métabolisme des nucléotides. Dans les cellules de souris, nm23-H1 a été associée à la régulation des programmes de motilité et d’adhésion cellulaires et peut influencer des réseaux de signalisation liés aux réponses au stress et à la différenciation. Une activité altérée de nm23-H1 est fréquemment étudiée dans le contexte de la biologie tumorale, où des modifications du comportement métastatique et du potentiel invasif ont été rapportées dans divers modèles. Ces propriétés font de Nme1 un locus utile pour explorer les voies qui relient l’homéostasie des nucléotides à la migration et au contrôle de la croissance.
nm23-H1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nme1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nme1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nme1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nme1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.