NIK Lentiviral Activation Particles (m2): sc-424749-LAC-2

Das Mausgen Map3k14 kodiert die NF-κB–induzierende Kinase (NIK), eine MAP3K, die als zentraler Aktivator des nichtkanonischen NF-κB-Signalwegs wirkt, indem sie nachgeschaltet von Rezeptoren wie BAFFR, CD40, LTβR und RANK die IKKα-abhängige Prozessierung von NF-κB2 p100 zu p52 fördert. Die NIK-Signalübertragung reguliert die Organogenese lymphatischer Organe, die Reifung und das Überleben von B-Zellen, die Differenzierung von Osteoklasten sowie entzündliche Transkriptionsprogramme, indem sie die Aktivität von MAPK- und NF-κB-Netzwerken koordiniert. Eine fehlregulierte Map3k14/NIK-Aktivität wird mit gestörter Immunhomöostase und chronischer Entzündung in Verbindung gebracht und ist in experimentellen Modellen für Autoimmunphänotypen sowie eine B‑Zell‑getriebene Pathobiologie relevant. Die Geneditierung von Map3k14 in der Maus ermöglicht mechanistische Untersuchungen der rezeptorproximalen Signalübertragung, der transkriptionellen Kontrolle und der zelltypspezifischen Beiträge des nichtkanonischen NF-κB-Signalwegs in der Immunologie- und Entzündungsforschung.

NIK Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Map3k14-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

NIK Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Map3k14-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen NIK-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Map3k14-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.