NIF3L1 BP1 Double Nickase Plasmid (m): sc-425902-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NIF3L1 BP1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NIF3L1 BP1 Double-Nickase-Plasmid (m) und NIF3L1 BP1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Thoc7 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NIF3L1 BP1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-425902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NIF3L1 BP1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-425902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Thoc7** codiert eine Komponente des THO/TREX‑Ribonukleoprotein-Komplexes, der die ko‑transkriptionelle mRNA‑Prozessierung und den effizienten Export reifer Transkripte aus dem Zellkern unterstützt. Indem THOC7 die Transkriptionselongation mit der Assemblierung von mRNPs koppelt, trägt es zur Aufrechterhaltung der RNA‑Qualitätskontrolle und der Genomstabilität bei und beeinflusst zelluläre Programme wie Proliferation und Differenzierung. Störungen TREX‑assoziierter Faktoren wurden mit abweichendem RNA‑Stoffwechsel, Transkriptions‑Replikations‑Konflikten und Stressantworten in Verbindung gebracht, die häufig an der Krebsbiologie und an neurodevelopmentalen Phänotypen beteiligt sind. Daher ist **Thoc7** ein nützliches Ziel, um zu untersuchen, wie RNA‑Export und R‑Loop‑Homöostase Genexpressionsnetzwerke in Säugerzellen prägen.
NIF3L1 BP1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Thoc7-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Thoc7 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Thoc7-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Thoc7-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.