Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402753-LAC

CHRNA9 kodiert die Alpha-9-Untereinheit des nikotinischen Acetylcholinrezeptors, eine Komponente eines ligandengesteuerten Ionenkanals, die sich mit Partneruntereinheiten zu einem Rezeptorassemblat zusammenfügt und so einen durch Acetylcholin ausgelösten Kationenfluss sowie nachgeschaltete Ca2+-abhängige Signalprozesse vermittelt. Die Aktivität von CHRNA9-assoziierten Rezeptoren beeinflusst die Membran-Erregbarkeit, synaptische und nicht-neuronale cholinerge Signalübertragung sowie die Modulation zellulärer Antworten über Signalwege, die an die Ionenhomöostase und Second-Messenger-Kaskaden gekoppelt sind. In menschlichen Geweben wurden veränderte CHRNA9-Expression oder Rezeptorfunktion mit sensorischer und inflammatorischer Biologie in Verbindung gebracht und im Kontext krebsbezogener Signalphänotypen sowie anderer Erkrankungen untersucht, die mit einer Fehlregulation cholinerger Signalwege einhergehen. Daher ist CHRNA9 ein nützliches Ziel, um die Zusammensetzung nikotinischer Rezeptoruntereinheiten, stimuliabhängige Transkriptionsprogramme und durch cholinerge Signale getriebene Zellzustandsübergänge zu analysieren.

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CHRNA9-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CHRNA9-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Nicotinic Acetylcholine Receptor alpha 9/CHRNA9-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CHRNA9-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.