NFAT5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401359

Visão geral

NFAT5 (fator nuclear de células T ativadas 5), também conhecido como TonEBP, é um fator de transcrição da família Rel que coordena a adaptação celular ao estresse hipertônico ao regular programas gênicos osmoprotetores, incluindo transportadores e enzimas envolvidos no acúmulo de osmólitos compatíveis. Em contextos imunes e epiteliais, o NFAT5 influencia a produção de citocinas, a polarização de macrófagos e a função de linfócitos, conectando o sensoriamento osmótico à sinalização inflamatória e a vias de sobrevivência celular. A atividade de NFAT5 se integra a redes de sinalização dependentes de MAPK e de cálcio e ajuda a manter a homeostase proteica e o controle do volume celular sob estresse. A desregulação da sinalização de NFAT5 tem sido associada a distúrbios inflamatórios, à fisiologia da medula renal e às respostas ao estresse no microambiente tumoral, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de adaptação ao estresse e regulação imune.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NFAT5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NFAT5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NFAT5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NFAT5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NFAT5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NFAT5 para a investigação da sinalização de NFAT5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NFAT5 críticos para a função NFAT5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NFAT5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NFAT5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NFAT5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NFAT5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NFAT5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NFAT5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NFAT5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NFAT5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.