Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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neuropilin-2 Double Nickase Plasmid (m): sc-421965-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das neuropilin-2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- neuropilin-2 Double-Nickase-Plasmid (m) und neuropilin-2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Nrp2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: neuropilin-2: sc-13117
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
neuropilin-2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421965-NIC | 20 µg | $410.00 |
Das murine Gen **Nrp2** kodiert **Neuropilin-2**, einen transmembranen Korezeptor, der **Semaphorine der Klasse 3** und Liganden der **VEGF-Familie** bindet, um Leit- und Wachstumsfaktorsignale zu modulieren. Durch die Kopplung an **Plexine** und **VEGF-Rezeptoren** beeinflusst Neuropilin-2 die Axonwegfindung, das Sprossenwachstum von Endothel- und Lymphgefäßen sowie Zellmigrationsprogramme, die durch Signalwege der Zytoskelett-Remodellierung gesteuert werden. Die Aktivität von Nrp2 greift in angiogene und lymphangiogene Signalnetzwerke ein und prägt dadurch die Gewebemusterung, den Transport von Immunzellen und stromale Interaktionen. Eine fehlregulierte Expression oder Signalübertragung von Neuropilin-2 wurde mit aberrantem vaskulärem Remodeling und invasiven Zellverhaltensweisen in Verbindung gebracht, die für die Krebsbiologie und entzündliche Mikroumgebungen relevant sind.
neuropilin-2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Nrp2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Nrp2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Nrp2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Nrp2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.