Neurophysin I Double Nickase Plasmid (h): sc-410922-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Neurophysin I Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Neurophysin I Double-Nickase-Plasmid (h) und Neurophysin I Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf OXT abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Neurophysin I Double Nickase Plasmid (h) | sc-410922-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Neurophysin I Double Nickase Plasmid (h2) | sc-410922-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane **OXT**-Gen kodiert das Oxytocin-Prepropeptid, das zum Oxytocin-Nonapeptid und zu seinem Trägerprotein **Neurophysin I** prozessiert wird; gemeinsam unterstützen sie die Peptidreifung, Stabilisierung und die regulierte Sekretion aus dem neurohypophysären System. Die Oxytocin-Signalübertragung erfolgt vor allem über den Oxytocinrezeptor und aktiviert eine Gq/PLCβ-abhängige Kalziummobilisierung sowie nachgeschaltete MAPK-Signalwege, wodurch neuroendokrine Freisetzungsprogramme und gewebespezifische kontraktile und sekretorische Antworten beeinflusst werden. Im Nervensystem trägt OXT-assoziierte Signalgebung zur Modulation von neuronalen Schaltkreisen bei, die soziale und stressbezogene Verhaltensweisen steuern, während periphere Wirkungen mit der Reproduktions- und Stoffwechselphysiologie verknüpft sind. Eine Fehlregulation oxytocinergischer Signalwege und der Peptidprozessierung wurde im Zusammenhang mit neuroentwicklungsbedingten und psychiatrischen Phänotypen sowie mit Störungen der Hypothalamus-Hypophysen-Funktion untersucht, wodurch OXT ein relevantes Ziel für mechanistische Studien der Neuropeptidbiologie darstellt.
Neurophysin I Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des OXT-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von OXT abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die OXT-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit OXT-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.