Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-429641

Übersicht

Nav2 kodiert Neuron Navigator 2, ein in Neuronen angereichertes, zytoskelettassoziiertes Protein, das an der Neuritenausbildung, der Axonführung und der neuronalen Migration beteiligt ist, indem es die Mikrotubuli-Dynamik und das Verhalten des Wachstumskegels koordiniert. Im sich entwickelnden und im reifen Nervensystem der Maus ist NAV2 mit Prozessen verknüpft, die die Bildung neuronaler Schaltkreise prägen, darunter die Etablierung der Polarität und gerichtetes Auswachsen als Antwort auf Leitsignale. Veränderte NAV2-assoziierte Signalwege wurden im Kontext neuroentwicklungsbezogener Phänotypen und von Funktionsstörungen des Nervensystems untersucht, bei denen gestörte Konnektivität und axonale Musterbildung zentrale Merkmale sind. Daher ist Nav2 ein nützliches Ziel, um Mechanismen der neuronalen Morphogenese und des Zytoskelett-Remodelings in krankheitsrelevanten Zellmodellen zu untersuchen.

Das Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Nav2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Nav2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Nav2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Neuron navigator 2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Nav2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Neuron navigator 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Nav2-Exone abzielen, die für die Neuron navigator 2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Nav2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Neuron navigator 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Nav2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Neuron navigator 2 HDR-Plasmid (m) und Neuron navigator 2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Nav2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Nav2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.