neurexin III CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406719

Übersicht

NRXN3 kodiert Neurexin III, ein präsynaptisches Zelladhäsionsmolekül, das die Bildung und Aufrechterhaltung von Synapsen organisiert, indem es an postsynaptische Partner wie Neuroligine und andere synaptische Gerüstproteine bindet. Über diese transsynaptischen Interaktionen trägt Neurexin III zur Regulation der Wahrscheinlichkeit der Neurotransmitterfreisetzung, der synaptischen Spezifizierung sowie des aktivitätsabhängigen Umbaus bei, der die Funktion neuronaler Schaltkreise formt. NRXN3 ist an Signalwegen beteiligt, die die Exozytose synaptischer Vesikel, calciumabhängige Signalübertragung und das Gleichgewicht zwischen exzitatorischen und inhibitorischen Signalen in sich entwickelnden und reifen Netzwerken steuern. Genetische Varianten und veränderte Expression von NRXN3 wurden mit neuroentwicklungsbezogenen und neuropsychiatrischen Phänotypen in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz in mechanistischen Studien zur synaptischen Konnektivität und zu Funktionsstörungen auf Schaltkreisebene unterstützt.

Das neurexin III CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NRXN3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NRXN3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NRXN3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die neurexin III-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NRXN3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der neurexin III-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NRXN3-Exone abzielen, die für die neurexin III-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NRXN3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom neurexin III CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom neurexin III CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NRXN3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das neurexin III HDR-Plasmid (h) und neurexin III HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NRXN3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NRXN3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.