Neurensin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423681

Descripción general

Nrsn1 codifica Neurensin-1, una proteína asociada a membranas y enriquecida en neuronas, implicada en el tráfico endosomal y en la organización de compartimentos vesiculares dentro de las neuritas. Neurensin-1 se ha vinculado a procesos que sostienen el desarrollo y el mantenimiento sinápticos, incluida la regulación de la clasificación de cargas y la dinámica de membranas intracelulares importantes para la conectividad neuronal. La alteración de la expresión de Nrsn1 o de su contexto en redes génicas se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos en estudios genéticos en ratón y en humanos, lo que destaca su relevancia para los circuitos que gobiernan el comportamiento. Como marcador y modulador del tráfico de membranas neuronales, Neurensin-1 es útil para investigar vías que acoplan la función de los endosomas con la estructura sináptica y la homeostasis neuronal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Neurensin-1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Nrsn1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Nrsn1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Nrsn1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Neurensin-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Nrsn1 para la investigación de la señalización de Neurensin-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Nrsn1 críticos para la función de Neurensin-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Nrsn1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Neurensin-1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Nrsn1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Neurensin-1 (m) y el plásmido HDR Neurensin-1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Nrsn1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Nrsn1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.