Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurensin-1 (m): sc-423681
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Neurensin-1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Neurensin-1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Neurensin-1 Antibody (22): sc-136360
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurensin-1 (m) | sc-423681 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Nrsn1 code la neurensine‑1, une protéine membranaire associée enrichie dans les neurones, impliquée dans le trafic endosomal et l’organisation des compartiments vésiculaires au sein des neurites. La neurensine‑1 a été associée à des processus qui soutiennent le développement et le maintien des synapses, notamment la régulation du tri des cargos et la dynamique des membranes intracellulaires, importantes pour la connectivité neuronale. Des altérations de l’expression de Nrsn1 ou de son contexte de réseau ont été associées à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques dans des études génétiques chez la souris et chez l’humain, soulignant sa pertinence pour les circuits qui gouvernent le comportement. En tant que marqueur et modulateur du trafic membranaire neuronal, la neurensine‑1 est utile pour étudier les voies qui relient la fonction des endosomes à la structure synaptique et à l’homéostasie neuronale.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Neurensin-1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Nrsn1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Nrsn1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Nrsn1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Neurensin-1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Nrsn1 pour l'étude de la signalisation de Neurensin-1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Nrsn1 essentiels à la fonction de Neurensin-1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Nrsn1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Neurensin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Neurensin-1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Nrsn1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Neurensin-1 plasmide HDR (m) et le Neurensin-1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Nrsn1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Nrsn1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.