Plasmide Double Nickase (h) Nek7: sc-405218-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Nek7 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Nek7 Double Nickase (h) et le plasmide Nek7 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NEK7. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Nek7 Antibody (B-5): sc-393539
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Nek7 | sc-405218-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Nek7 | sc-405218-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NEK7 code la kinase sérine/thréonine Nek7, une kinase apparentée à NIMA qui régule la fonction du centrosome, l’assemblage du fuseau mitotique et la progression à travers la mitose en coordonnant la dynamique des microtubules et les points de contrôle du cycle cellulaire. Nek7 participe également à des voies de signalisation sensibles au stress, notamment à la régulation de l’activation de l’inflammasome NLRP3 et des réponses inflammatoires en aval, établissant un lien entre le contrôle de la division cellulaire et les voies de l’immunité innée. Une activité ou une expression dérégulée de NEK7 a été associée à une prolifération aberrante et à une instabilité génomique, ce qui en fait une cible d’intérêt pour les études sur la biologie tumorale et les pathologies liées au cycle cellulaire. Par conséquent, NEK7 est fréquemment étudié dans des modèles de régulation de la mitose, de remodelage du cytosquelette et de phénotypes cellulaires associés à l’inflammation.
Nek7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NEK7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NEK7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NEK7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NEK7.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.