Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
NDRG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424349
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NDRG3 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NDRG3, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NDRG3 Anticuerpo (H-11): sc-514561
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NDRG3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424349 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ndrg3 codifica NDRG3, una proteína citoplasmática de la familia NDRG implicada en la regulación del crecimiento celular, la diferenciación y la adaptación al estrés. En sistemas murinos, NDRG3 se ha relacionado con la señalización metabólica y con vías asociadas a la hipoxia, incluidos mecanismos de estabilización dependientes de lactato que pueden influir en programas transcripcionales aguas abajo. La actividad alterada de NDRG3 se ha estudiado en contextos de control de la proliferación y supervivencia celular, lo que la hace relevante para investigar cómo las señales metabólicas moldean la homeostasis tisular. Estas funciones sitúan a NDRG3 como un nodo útil para desentrañar el diálogo cruzado entre la detección de nutrientes, las respuestas hipóxicas y las decisiones de destino celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NDRG3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ndrg3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ndrg3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ndrg3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NDRG3.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ndrg3 para la investigación de la señalización de NDRG3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ndrg3 críticos para la función de NDRG3
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ndrg3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NDRG3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido NDRG3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ndrg3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NDRG3 (m) y el plásmido HDR NDRG3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ndrg3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ndrg3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.